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      生物知識

      細胞培養(yǎng)常識(二)

      作者:admin 來源:本站 發(fā)布時間: 2016-09-13 15:37  瀏覽次數(shù):
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      1
      培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?

      一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為PH緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時。則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細胞。(配置培養(yǎng)基時,如果攪動過多會使 NaHCO3轉(zhuǎn)變?yōu)闅怏w而丟失,使培養(yǎng)基的PH緩沖能力下降。)

       

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      何時須更換培養(yǎng)基

      視細胞生長密度而定,撲滿皿或瓶即可更換培養(yǎng)基即可。

       

      3

      培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?

       

      除于特殊篩穿系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。

       

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      欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?

      欲回收動物細胞,其離心速率一般為300g(約1000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡。

       

       

      5
      細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?

      動物細胞冷凍保存時最長使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成。

       

      6
      DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?

      冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grand之DMSO,基本身即為無菌狀況,第一次開瓶后應(yīng)立即少量分裝與無菌試管中,保存于4度,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則需使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜。

       

       

       

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