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      生物知識

      液氮罐應(yīng)用---牛冷凍精液的保存及使用

      作者:admin 來源:中國畜牧獸醫(yī)報 發(fā)布時間: 2010-12-24 08:32  瀏覽次數(shù):
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      牛精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理,保存在超低溫下,以達(dá)到長期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。其最大優(yōu)點(diǎn)是可長期保存,使用不受時間、地域以及種用雄性動物壽命的限制??沙浞痔岣吖5睦寐省,F(xiàn)將冷凍精液的保存和怎樣進(jìn)行解凍及給母牛輸精的有關(guān)技術(shù)操作介紹如下,供參考。
        稀釋液的配方
        12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黃液20毫升。
        稀釋方法
        將經(jīng)過檢查合格的精液按1∶2倍~5倍稀釋液進(jìn)行稀釋,其稀釋原則應(yīng)保證每個顆粒精液中所含精子數(shù)不少于3000萬個~4000萬個,解凍后呈直線前進(jìn)運(yùn)行的精子不少于1500萬個。
        冷凍
        在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng),距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng),滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘,當(dāng)精液顆粒顏色變白時,立即浸入液氮,并將全部顆粒取下,收集于儲精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi),并做好標(biāo)記,然后立即移入液氮罐中儲存。
        解凍
        將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升,放入干凈的小試管中,再置于40℃左右的溫水杯中,迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動至化凍時,從水杯中取出試管,接著檢查精液活力,即為合格品。
        重視保精、快速解凍與鏡檢
        1.根據(jù)液氮罐的性能要求,定期添加液氮,罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。
        2.取精時,盡可能用長鑷子,切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右)。
        3.從液氮中取出細(xì)管凍精時,要輕輕甩一兩下,將塑料細(xì)管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中,把封口端留在水外3厘米外,待管內(nèi)精液融化一半時,立即取出備用。
        4.解凍后的精液鏡檢時,精子的活力不低于標(biāo)準(zhǔn)方可用于輸精,才能確保正常受精。
        5.解凍后的精液應(yīng)立即輸配,不宜停放時間過長,應(yīng)做到現(xiàn)解凍,現(xiàn)輸精。
        適時輸精
        母牛正常排卵是在發(fā)情結(jié)束后6小時~12小時,精子在母牛生殖道的存活時間為12小時~20小時,且還需要4小時~6小時的獲能過程,才能與卵子結(jié)合受精。精子15分鐘就會到達(dá)輸卵管受精部位,因此,讓精子早于卵子到達(dá)輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。
        1.適宜的輸精時間:在母牛的發(fā)情后期。此時母牛表現(xiàn)精神平穩(wěn),外陰部腫脹消失,陰道不再流出透明液體。直腸檢查卵泡脹大,表面緊張,有一觸即破之感,此時為最佳輸精時間。
        2.適宜的輸精部位:在子宮頸內(nèi)口1厘米處即子宮體基部,過淺易導(dǎo)致精液外流,過深易損傷子宮內(nèi)黏膜。
        3.適宜的輸精方法:直腸把握子宮頸輸精法。將母牛保定,左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸后端,右手將輸精器自陰門向斜上方緩慢插入5厘米~10厘米(以避開尿道口)再改為平插送到子宮頸口,緩慢越過子宮頸管中的皺壁,到達(dá)子宮頸基部,慢慢注入精液后,緩緩抽出輸精器。
        4.適宜的輸精次數(shù):以1次~2次為宜??稍诎l(fā)情母牛發(fā)情高潮后,黃牛在發(fā)情高潮后6小時~12小時,水牛在發(fā)情高潮后18小時~20小時進(jìn)行第一次輸精,前后間隔8小時~12小時再進(jìn)行第二次輸精。 

       

       

      程序降溫儀  網(wǎng)址鏈接  http://www.effectnews.cn/a/gb2312/yiqi/CryoLogic/2013/0904/5082.html

      胚胎冷凍儀  網(wǎng)址鏈接 http://www.effectnews.cn/a/gb2312/yiqi/CryoLogic/2010/0428/3073.html

      購買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 www.effectnews.cn

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